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达学堂·答疑讨论

Q:本科室用透明液透明和清洗蜡缸,请问清洗蜡缸的液体没洗几次就成米糊样,请问这是什么问题呢?

答:这个可能是有石蜡液体的残留。本身这样的液体也是不能常时间使用的,因为清理蜡缸是很费试剂的。不妨建议在清理蜡缸之前可用软布或一次性纸巾先把蜡缸中残留的蜡液擦拭干净,然后再开始清理,尽量减少后续清洗的负担,增加清洗液使用的寿命。如果真如提问者所说的,米糊状物出现了,宁可更换新液,以免米糊残留堵塞机器管道,得不偿失。

Q:脂肪组织有没有好的脱水程序?

答:浙江丁伟老师和北京的周立新老师在2019年3月第46卷第3期《中华病理学杂志》上面发表过一篇文章,题目是“组织脱水过程中脱脂发的研究”,专门针对脱脂的程序进行的实践和摸索,那篇文章非常有参考意义,对脂肪组织完美地制片起到指导和参考作用。

Q:一些组织展片容易裂片,除了水温还有哪些要注意的?放水里就裂了。

答:有一些组织,如脂肪组织,还没有放在热水里面就散了,放在冷水里也是这样。所以组织处理一定要规范完善,才会避免组织裂片的出现。对于提问老师的情况,建议用冷水先漂片,然后再移到热水里面很快就把它粘贴到载玻片上去,不要在热水里面停留时间,另外再适当地把水温降低一点,切片保证平整一点。

Q:组织脱过了,怎么处理?

答:首先,检查一下脱过的组织固定是否合乎规范?取材厚度是否偏薄?再要看你具体面临的是什么样的脱过情况,如果是很硬、很脆,并且很严重的话,建议就要退回处理。如果不是很严重,有一种软化处理的方法,可以补救一下,即用5N的盐酸浸泡一下试着再切切看,可能会缓解一点,具体步骤:1.将组织蜡块面朝下,置入带有5 N 盐酸的玻璃容器或塑料容器内,浸泡5 min~10 min,取出后用干纱布擦去蜡块表面的盐酸。2.蜡块不须冷冻,在室温(25 ℃)下直接在切片机切片,切片厚度4 μm。3.裱片时,先将切片光面朝下放入冷水中,然后,再用干净的载玻片将其移入漂片仪的水槽内,温度约45 ℃~47 ℃;略展片刻,待切片充分展平后,迅速裱贴在载玻片上。4.常规烘/烤切片、染色、封固。

Q:包埋后蜡块有冻裂怎么处理?

答:如果肉眼观察冻裂的情况不是很严重,不影响切片的话,可以正常切片,保证裱片时合适的水温就可以了。如果肉眼观察冻裂的情况很严重,影响切片的话,建议把蜡块融化后重新包埋。

Q:同批次胃镜标本有少量标本有裂隙。

答:裂隙有时候是组织处理的问题,但是也不排除在切片的时候切片机器部件松动、一次性刀片没夹紧、包埋盒没有二次灌注石蜡没有增加稳固性导致的问题。就组织处理的流程来讲的话,可能是因为胃镜活检小组织标本打包处理或混合型处理,标本没有固定好,加上又打了纸包,这个时候如果一旦固定不好,那么,在后续脱水处理,进入乙醇的环节包括透明环节时,就会出现硬化,硬化的组织在切片的时候就会产生这样的裂隙。因此,切片质量问题的产生,和制片的每一个环节都是密切相关、相互关联的。

Q:染色的时候镜下经常会看到苏木素残留。

答:这个是很正常的。苏木素残留有几种形式。一种是没有洗干净而残留,就是说染色时要保证水洗充分;还有一种就是分化不足可能造成苏木素染液在载玻片上的残留,提醒我们工作时需要保证分化液的纯度;另外,也有可能是苏木素过期了,有一些类似金属结晶一样渣滓的残留,告诉我们每天染色之前需要做好染液的过滤。总之,每种情况都要分析清楚,判断准确。
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